วิธีการผลิตออกซิโตซินที่มีความบริสุทธิ์สูง-

วิธีที่ 1: วิธีการสกัด (วิธีการที่ใช้ในประเทศของฉันในปัจจุบัน ให้ความบริสุทธิ์ต่ำกว่า แต่ต้นทุนการผลิตต่ำกว่า)
การสกัดสารละลายออกซิโตซิน: นำผงต่อมใต้สมองแห้ง 100 กรัม และผงควอตซ์ 30 กรัม ใส่ลงในเครื่องบดลูกบอล แล้วเติมน้ำกลั่น ทำการสกัดสี่ครั้งโดยใช้ขั้นตอนเดียวกันนี้ ปริมาตรของน้ำกลั่นที่เติมสำหรับแต่ละขั้นตอนมีดังนี้: 1.4 ลิตรสำหรับการสกัดสองครั้งแรก และ 1.3 ลิตรสำหรับสองขั้นตอนถัดมา การสกัดแต่ละครั้งจะดำเนินการเป็นเวลา 45 นาที ตามด้วยการปั่นเหวี่ยงเพื่อรวบรวมของเหลว สารตกค้างที่เหลือจะถูกนำไปสกัดต่อไป สารสกัดทั้ง 4 ชนิดจะถูกนำมารวมกันเพื่อให้ได้สารละลายออกซิโตซิน โดยสรุป: ผงต่อมใต้สมองแห้ง [น้ำ, มิลล์มิลล์] → สารสกัดออกซิโตซิน → การแยกโครมาโตกราฟี

นำซีโอไลต์สังเคราะห์ที่เตรียมไว้ล่วงหน้า- 1,500 กรัม เติมสารละลายกรดอะซิติก 0.25% 20 ลิตร และ-หลังจากคนแล้ว-เทส่วนผสมลงใน-คอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออน เมื่อระดับสารละลายกรดอะซิติกลดลงถึงจุด 2-3 ซม. เหนือพื้นผิวของซีโอไลต์เบด ให้แนะนำสารสกัดออกซิโตซินทันที รักษาอัตราการไหลที่เหมาะสมและรวบรวม eluate สีขาวขุ่นที่ได้ (ส่วนนี้ประกอบด้วยออกซิโตซินเป็นหลัก เนื่องจากออกซิโตซินมีจุดไอโซอิเล็กทริก [pI] เท่ากับ 7.7-ในขณะที่วาโซเพรสซินมี pI เท่ากับ 10.9-วาโซเพรสซินจะก่อให้เกิดไอออนบวกได้ง่ายและถูกดูดซับลงบนคอลัมน์) ทันทีที่ระดับของเหลวของสารสกัดลดลงถึงพื้นผิวของซีโอไลต์เบด ให้เติมน้ำกลั่นทันทีและกักเก็บความขุ่นต่อไปจนกว่าการไหลจะหยุดลง ปรับ pH ของสารชะล้างความขุ่นที่รวบรวมไว้เป็น 3.5 โดยใช้กรดอะซิติกน้ำแข็ง อุ่นสารละลายอย่างรวดเร็วในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 95 องศา รักษาอุณหภูมินี้ไว้เป็นเวลา 3 นาที จากนั้นทำให้สารละลายเย็นลงอย่างรวดเร็ว และแช่เย็นข้ามคืน โดยสรุป: สารสกัดออกซิโตซิน [HAc, คอลัมน์ซีโอไลต์สังเคราะห์] → สารชะล้างความขุ่น [HAc, เครื่องทำความร้อน] → สารละลายที่แยกจากกัน → การดูดซับและการชะล้าง ในวันรุ่งขึ้นให้กรองสารละลายแช่เย็น ในการกรอง ให้เติมสารละลายเบนโทไนต์ 10% ขณะกวน (เติมสารละลาย 3 มล. ต่อการกรอง 100 มล.) กวนต่อเป็นเวลา 1 ชั่วโมงเพื่อให้ดูดซับได้ง่ายขึ้น จากนั้นจึงปั่นแยกส่วนผสม ทดสอบของเหลวเหนือตะกอนโดยใช้สารละลายกรดซัลโฟซาลิไซลิก การไม่มีตะกอนใด ​​ๆ บ่งชี้ว่ากระบวนการดูดซับเสร็จสมบูรณ์ หากการดูดซับไม่สมบูรณ์ ให้ทำซ้ำขั้นตอนการบำบัดเบนโทไนท์ จากนั้นจึงรวมตะกอนเบนโทไนต์ที่ได้จากขั้นตอนการดูดซับทั้งสองขั้นตอนเข้าด้วยกัน เบนโทไนต์ถูกชะสี่ครั้งโดยใช้กรดอะซิติก 1% (โดยมีปริมาตร 1.6 ลิตร, 1.4 ลิตร, 1.2 ลิตร และ 0.8 ลิตร ตามลำดับ) สำหรับสารชะแต่ละตัว *tert*-บิวทิลไตรคลอไรด์จะถูกเติมเมื่อสารละลายได้รับความร้อนถึง 80 องศา; จากนั้นอุณหภูมิจะเพิ่มขึ้นเป็น 95 องศา ทำให้เย็นลงอย่างรวดเร็วถึง 25 องศา แล้วกรองหรือปั่นแยก ผลการกรองสี่ผลลัพธ์จะถูกรวมเข้าด้วยกันเพื่อกำหนดศักยภาพและขีดจำกัดของวาโซเพรสซิน ผังกระบวนการมีดังนี้: สารละลายแช่เย็น [การกรอง] → กรอง [สารละลายเบนโทไนต์] → ดูดซับ [1% HAc] → Eluate การเตรียมการฉีดออกซิโตซิน:

สารละลายออกซิโตซินที่วิเคราะห์แล้ว ซึ่งตรงตามมาตรฐานคุณภาพ ถูกเจือจางให้มีความเข้มข้น 5 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร หรือ 10 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร จากนั้นกรองผ่านกรวยแก้วซินเตอร์ No. 4 หรือ No. 5 เติมลงในหลอดแก้ว และฆ่าเชื้อโดยใช้ไอน้ำไหลที่ 100 องศาเป็นเวลา 30 นาทีเพื่อให้ได้ผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย ผังกระบวนการเป็นดังนี้: สารละลายออกซิโตซิน (ผ่านการทดสอบ) [การกรอง การบรรจุ การทำหมัน] → การฉีดออกซิโตซิน

การสร้างซีโอไลต์สังเคราะห์ใหม่: ซีโอไลต์สังเคราะห์จะถูกล้างสองครั้งด้วยน้ำกลั่น จากนั้นเติมน้ำ 1.5 ลิตร (คำนวณจากซีโอไลต์ 500 กรัม) และโซเดียมคลอไรด์ 150 กรัม และคนส่วนผสมเป็นเวลา 2 ชั่วโมงเพื่อล้างและกำจัดวาโซเพรสซินออก จากนั้นซีโอไลต์จะถูกล้างด้วยน้ำกลั่นจนกระทั่งไม่มีคลอไรด์ไอออนเหลืออยู่ เติมน้ำในปริมาณที่เหมาะสม และปรับ pH เป็น 9 โดยใช้โซเดียมไฮดรอกไซด์ ผสมให้เข้ากันเป็นเวลา 30 นาที หลังจากนั้นจึงเทส่วนเหนือตะกอนออก ซีโอไลต์ถูกล้างด้วยน้ำกลั่น ปรับ pH เป็น 5.5–6 โดยใช้กรดซัลฟิวริก และล้างอีกครั้งด้วยน้ำจนเกือบเป็นกลาง จากนั้นกรองเพื่อเอาน้ำส่วนเกินออกและตากให้แห้งที่อุณหภูมิ 105 องศาเพื่อใช้ในอนาคต ก่อนใช้งาน ให้เติมน้ำในปริมาณที่เหมาะสม และปรับ pH โดยใช้กรดอะซิติกน้ำแข็งขณะกวนเพื่อให้แช่ตัว การเตรียมสารละลายเบนโทไนต์ 10%: เบนโทไนต์และน้ำผสมกันที่อัตราส่วนมวล-ต่อ-ปริมาตร 1:10 บดส่วนผสมเป็นเวลาประมาณ 1 ชั่วโมง ในระหว่างนี้ให้เติมกรดอะซิติกเพื่อรักษา pH ให้คงที่ที่ 3.5 สารละลายที่ได้จะถูกเก็บไว้ในตู้เย็นเพื่อใช้ในอนาคต วิธีที่ 2: การสังเคราะห์ทางเคมี ขั้นแรก เฮปตาเปปไทด์เอไมด์ (ส่วนที่ 3–9) จะถูกสังเคราะห์โดยเริ่มจากเบนซิลออกซีคาร์บอนิล-ลิวซีน *p*-ไนโตรฟีนิลเอสเทอร์; ต่อไป เบนซิลออกซีคาร์บอนิล-S-เบนซิลซิสเทอีน-ไทโรซีนเอไซด์ (ส่วนที่ 1–2) ถูกสังเคราะห์ขึ้น และในขั้นตอนที่สาม จะทำการสังเคราะห์ออกซิโตซิน